免疫組化檢測服務指應用免疫學抗原與抗體特異性結合的原理,通過化學反應使標記抗體的顯色劑(熒光素、酶、金屬離子、同位素)顯色,確定組織或細胞內(nèi)抗原(多肽和蛋白質),對其進行定位、定性及相對的定量檢查。
免疫組化檢測的常用方法:
1.免疫熒光法
是最早建立的免疫組織化學技術。先將已知抗體標上熒光素,以此作為探針檢查細胞或組織內(nèi)的相應抗原,在熒光顯微鏡下觀察。當抗原抗體復合物中的熒光素受激發(fā)光的照射后即會發(fā)出一定波長的熒光,從而可確定組織中某種抗原的定位,進而還可進行定量分析。
2.免疫酶標法
免疫酶標方法是繼免疫熒光后,于60年代發(fā)展起來的技術。先以酶標記的抗體與組織或細胞作用,然后加入酶的底物,生成有色的不溶性產(chǎn)物或具有一定電子密度的顆粒,通過光鏡或電鏡,對細胞表面和細胞內(nèi)的各種抗原成分進行定位研究。免疫酶標技術是目前的技術。主要優(yōu)點是定位準確,對比度好,染色標本可長期保存,適用于光鏡、電鏡研究等。目前免疫酶標法在病理診斷中廣為使用的有ABC法、SP三步法、即用型二步法檢測系統(tǒng)等。
3.免疫膠體金技術
是以膠體金這樣一種特殊的金屬顆粒作為標記物。膠體金能迅速而穩(wěn)定地吸附蛋白,對蛋白的生物學活性沒有明顯影響。用膠體金標記一抗、二抗或其他能特異性結合免疫球蛋白的分子(如葡萄球菌A蛋白)等作為探針,可對組織或細胞內(nèi)的抗原進行定性、定位,甚至定量。特別適合于免疫電鏡的單標記或多標記定位。也適合進行光鏡觀察。